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首頁(yè) > 技術(shù)文章
  • T淋巴細(xì)胞的分離技術(shù)
    2010-7-1 1843
    (一)原理混合單個(gè)核細(xì)胞懸液在通過(guò)尼龍毛柱時(shí),B細(xì)胞、漿細(xì)胞、單核細(xì)胞和一些輔助細(xì)胞被選擇性粘附于尼龍毛上,而多數(shù)T細(xì)胞則通過(guò)尼龍毛柱,這是獲得富含T細(xì)胞群的有效方法。(二)材料及試劑1.尼龍毛(FemwallLaboratories,LP-1LeukoqakleukocyteFilters)。2.燒杯、鋁箔、漏斗、一次性手套等。3.裝填尼龍毛柱,一次性注射器。4.取自然沉降的上層血漿,過(guò)聚蔗糖—泛影葡胺分層液后,獲取的血漿和分層液之間的單個(gè)核細(xì)胞層。(三)操作方法1.尼龍毛...

  • 細(xì)胞凋亡的幾種檢測(cè)方法
    2010-6-30 1907
    一、形態(tài)學(xué)觀察方法1、HE染色、光鏡觀察:凋亡細(xì)胞呈圓形,胞核深染,胞質(zhì)濃縮,染色質(zhì)成團(tuán)塊狀,細(xì)胞表面有“出芽”現(xiàn)象。2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細(xì)胞核呈黃綠色熒光,胞質(zhì)呈紅色熒光。凋亡細(xì)胞核染色質(zhì)呈黃綠色濃聚在核膜內(nèi)側(cè),可見(jiàn)細(xì)胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。3、臺(tái)盼藍(lán)染色:如果細(xì)胞膜不完整、破裂,臺(tái)盼藍(lán)染料進(jìn)入細(xì)胞,細(xì)胞變藍(lán),即為壞死。如果細(xì)胞膜完整,細(xì)胞不為臺(tái)盼藍(lán)染色,則為正常細(xì)胞或凋亡細(xì)胞。此方法對(duì)反映細(xì)胞膜的完整性,區(qū)別壞死細(xì)胞有一定的幫助。4、透射電鏡觀察:...

  • 生物傳感器的研究現(xiàn)狀及應(yīng)用
    2010-6-25 2651
    一、引言從1962年,Clark和Lyonszui先提出生物傳感器的設(shè)想距今已有40年。生物傳感器在發(fā)酵工藝、環(huán)境監(jiān)測(cè)、食品工程、臨床醫(yī)學(xué)、軍事及軍事醫(yī)學(xué)等方面得到了深度重視和廣泛應(yīng)用。在zui初15年里,生物傳感器主要是以研制酶電極制作的生物傳感器為主,但是由于酶的價(jià)格昂貴并不夠穩(wěn)定,因此以酶作為敏感材料的傳感器,其應(yīng)用受到一定的限制。近些年來(lái),微生物固定化技術(shù)的不斷發(fā)展,產(chǎn)生了微生物電極。微生物電極以微生物活體作為分子識(shí)別元件,與酶電極相比有其獨(dú)到之處。它可以克服價(jià)格昂貴...

  • 小鼠單個(gè)核細(xì)胞分離一步梯度法去除死細(xì)胞
    2010-6-24 2298
    基本原理活細(xì)胞(密度較?。┖退兰?xì)胞(密度較大)密度不同,從而有助于將活的淋巴細(xì)胞和紅細(xì)胞分離。附加材料高密度溶液:Ficoll-Paque(Ficoll和泛影酸鈉;PharmaciaLKB)或Lympholyte-M(Cedarlane)12ml或50ml聚丙烯離心管(比聚苯乙烯離心管好)注:Ficoll-Paque和Lympholyte-M的密度與溫度有關(guān);該方法中所采用的以及其他商品化的高密度溶液適合在室溫中使用。因此應(yīng)注意使細(xì)胞懸液、離心和高密度溶液控制在室溫。否則會(huì)因...

  • 蛋白質(zhì)的濃縮技術(shù)方法
    2010-6-23 1716
    (一)濃縮膠濃縮法濃縮膠是一種高分子網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的有機(jī)聚合物,具有很強(qiáng)的吸水性能。每克干膠可吸水120ml~150ml。它能吸收低分子量的物質(zhì),如水、葡萄糖、蔗糖、無(wú)機(jī)鹽等,適宜濃縮10000分子量以上的生物大分子物質(zhì)。濃縮后,蛋白質(zhì)的回收率可達(dá)80%~90%。比濃縮膠應(yīng)用方便,直接加入被濃縮的溶液中即可。必須注意,濃縮溶液的pH值應(yīng)大于被濃縮物質(zhì)的等電點(diǎn),否則在濃縮膠表面產(chǎn)生陽(yáng)離子交換,影響濃縮物質(zhì)的回收率。(二)冷凍干燥濃縮法這是濃縮蛋白質(zhì)的一種較好的辦法,它既使蛋白質(zhì)不易變...

  • 紫外線消毒器應(yīng)用
    2010-6-22 1770
    一、紫外線消毒器消毒原理時(shí)紫外線按其生物學(xué)作用的差異,紫外線可分為UV-A(320-400nm)、UV-B(275-320nm)、UV-C(200-275nm)和真空紫外線部分。水處理中實(shí)際上是使用紫外線的UV-C部分,在該波段中260nm附近已被證實(shí)是殺菌效率zui高的紫外線。冠宇紫外線消毒器集光學(xué)、微生物學(xué)、機(jī)械、化學(xué)、電子、流體力學(xué)等綜合科學(xué)為一體。采用特殊設(shè)計(jì)的率、高強(qiáng)度和長(zhǎng)壽命的紫外UV-C光發(fā)生裝置產(chǎn)生的強(qiáng)紫外UV-C光照射流水。當(dāng)水中的細(xì)菌、病毒等受到一定劑量的...

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