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主體內(nèi)容：1.標(biāo)本的采集正常動物細(xì)菌檢測主要檢查呼吸道和腸道，分別取氣管分泌物及腸內(nèi)容物做細(xì)菌培養(yǎng)檢查。對于發(fā)病動物，采取其病變組織和臟器做細(xì)菌學(xué)檢查。2.細(xì)菌的培養(yǎng)細(xì)菌是單細(xì)胞的原核生物，絕大部分都可以在人工培養(yǎng)基上進行繁殖，只有少數(shù)例外，如泰澤病原體需在活細(xì)胞中繁殖。不同細(xì)菌種類所要求的zui適生長條件不盡相同，有些細(xì)菌需在有氧的環(huán)境下才能生長，稱為需氧菌；有些只能在無氧環(huán)境下生長，稱為厭氧菌；還有一些細(xì)菌在有氧、無氧環(huán)境下都可以生長，稱為兼性厭氧菌。培養(yǎng)細(xì)菌的目的，是從...

李軻反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）是一種體外核酸擴增技術(shù)，它具有特異、敏感、快速、簡便、重復(fù)性好、易自動化等突出優(yōu)點，能在幾個小時內(nèi)完成從一根毛發(fā)、一滴血、甚至一個細(xì)胞中擴增出足量的目的產(chǎn)物供分析研究和檢測鑒定，所以近年來RT-PCR技術(shù)被廣泛應(yīng)用于人和動物的多種傳染病早期診斷。筆者一直從事實驗室動物疫病檢測工作，現(xiàn)就應(yīng)用RT-PCR實驗方法過程中出現(xiàn)的一些常見污染問題做如下論述，僅共同行參考和探討。RT-PCR實驗有三步：提取RNA、反轉(zhuǎn)錄（RT）、PCR擴增及擴增產(chǎn)...

輔助方案：膠原酶消化制備脾臟細(xì)胞懸液實驗材料：1.4000U/ml膠原酶D，融化后置于冰上2.HBSS，已滅菌，含Ca+、Mg2+（購置于LifeTechnologies）3.小鼠脾臟4.皮下注射針，22G×11/2in內(nèi)徑（BectonDickinson）5.10ml、5ml一次性注射器（如BectonDickinson）6.100mm直徑培養(yǎng)皿（如Falcon）7.2個高壓滅菌鍋的鋸齒狀解剖鑷（如Roboz）8.高壓滅菌的不銹鋼網(wǎng)：將40目的不銹鋼網(wǎng)剪成5cm×5cm的小...

腫瘤是細(xì)胞在各種致瘤因素的作用下，基因發(fā)生改變，失去對其生長的正常調(diào)控，導(dǎo)致細(xì)胞異常增生。惡性腫瘤又稱為癌癥（cancer），是目前危害人類健康zui嚴(yán)重的一類疾病。我國城市地區(qū)居民死因*位為惡性腫瘤。腫瘤細(xì)胞在很多生物學(xué)特性上不同于正常細(xì)胞，也有別于修復(fù)性增生的細(xì)胞，具有明顯的去分化現(xiàn)象。一、腫瘤細(xì)胞的分化特征惡性腫瘤細(xì)胞的特征之一是分化程度低，表現(xiàn)為形態(tài)上的幼稚性，功能上的異常，細(xì)胞的多種表型（phenotype）又回到原始的胚胎細(xì)胞表型，即發(fā)生細(xì)胞的去分化現(xiàn)象。機體在致...

生物、藥物等許多的研究均需要通過觀察細(xì)胞體積的變化或細(xì)胞數(shù)目增減的來判斷和評估實驗的效果。由于細(xì)胞所處環(huán)境的改變可促使其自身體積做出相應(yīng)的變化，以便適應(yīng)改變后的環(huán)境大致新的平衡。由于并不能清晰地知道該種細(xì)胞體積變化規(guī)律，因此必須檢測其體積或細(xì)胞數(shù)目隨條件、時間的變化。細(xì)胞的發(fā)育與細(xì)胞分裂周期級數(shù)遞增均需要連續(xù)不斷的細(xì)胞增殖。在培養(yǎng)液中正在增殖的細(xì)胞在其分裂前其體積將增大至原體積的兩倍。然而對細(xì)胞發(fā)育與分裂的速度作如何調(diào)整才能保證細(xì)胞體積的不變并不明確。因此，測量細(xì)胞的體積的變...

二、實驗原理細(xì)胞死亡根據(jù)其性質(zhì)、起源及生物學(xué)意義區(qū)分為凋亡和壞死兩種不同類型。凋亡普遍存在于生命界，在生物個體和生存中起著非常重要的作用。它是細(xì)胞在一定生理條件下一系列順序發(fā)生事件的組合，是細(xì)胞遵循一定規(guī)律自己結(jié)束生命的自主控制過程。細(xì)胞凋亡具有可鑒別的形態(tài)學(xué)和生物化學(xué)特征。在形態(tài)上可見凋亡細(xì)胞與周圍細(xì)胞脫離接觸，細(xì)胞變園，細(xì)胞膜向內(nèi)皺縮、胞漿濃縮、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張、細(xì)胞核固縮破裂呈團塊狀或新月狀分布、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和細(xì)胞膜進一步融合將細(xì)胞分成多個完整包裹的凋亡小體，凋亡小體zui后被吞噬...